中国科学院华南植物园果蔬保鲜技术研发与利用团队前期研究发现，低温胁迫下miR528通过调控多酚氧化酶PPO的表达引发采后香蕉果皮的活性氧失衡和果皮褐变，而在香蕉果皮中瞬时过表达miR528延缓了冷害发生（图1）。进一步研究发现，香蕉基因组中大多数MaSPL受冷胁迫抑制，其中MaSPL4/5/25/42/44能够结合MIR528的启动子并激活其表达，且其中MaSPL4/5/42/44同时又是miR156c的靶基因。随后通过瞬时转化结合多重实验明确了miR156c-MaSPL4在香蕉冷胁迫响应中的功能（图2）。再利用DAP-seq和RNA-seq联合分析鉴定并初步验证了数个与冷胁迫表型相关的MaSPL4靶基因。基于此，提出了一个参与香蕉冷胁迫响应的级联工作模型，即在冷胁迫下，香蕉果皮中miR156c显著上调，而其靶基因MaSPL4显著下调，进而抑制受其转录调控的miR528积累，造成miR528的靶基因MaPPO显著上调，引发活性氧大量累积。同时，MaSPL4还可能通过干扰果皮中长链脂肪酸与角质合成来影响其结构的稳定性，最终导致香蕉果皮的冷害表型（图3）。该研究揭示了相对独立于CBF/DREB1 (C-repeat binding factor/dehydration responsive element binding 1) 经典信号通路外的一条新的冷应激途径，丰富了香蕉冷害的分子机制，同时为培育抗冷香蕉品种提供了靶标分子。
图1 瞬时过表达miR528延缓香蕉果皮冷害发生
图2 香蕉冷胁迫响应中miR156c-MaSPL4模块的功能验证
图3 参与香蕉冷胁迫响应的miR156c-SPL4-miR528-PPO级联工作模型
相关研究结果以”Transcriptional regulation of miR528-PPO module by miR156 targeted SPLs orchestrates chilling response in banana”为题，于近日发表在园艺学高水平期刊Molecular Horticulture（https://doi.org/10.1186/s43897-024-00115-1）上。孔祥锦博士为本论文第一作者，朱虹副研究员和屈红霞研究员为共同通讯作者。蒋跃明研究员、段学武研究员、云泽副研究员、单幼霞博士和硕士生彭宽参与了本研究。同时，英国东安格利亚大学Tamas Dalmay教授参与了合作研究。该项研究得到了国家自然科学基金、广东省自然科学基金和中国科学院国际访问学者等项目的资助。
参考文献
1. Zhu H, Chen C, Zeng J, Yun Z, Liu YL, Qu H, et al. MicroRNA528, a hub regulator modulating ROS homeostasis via targeting of a diverse set of genes encoding copper-containing proteins in monocots. New Phytol. 2020; 225:385–399.
2. Zhu H, Zhang Y, Tang R, Qu H, Duan X, Jiang Y. Banana sRNAome and degradome identify microRNAs functioning in differential responses to temperature stress. BMC Genomics. 2019; 20:33.